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标记

脉冲 STED 激光器	波长 [nm]	775			595
激发激光器	波长 [nm]	640	561	594	485
abberior 显微镜		INFINITY FACILTY STEDYCON	INFINITY FACILTY STEDYCON		INFINITY FACILTY
始终推荐		abberior STAR RED abberior STAR 635P abberior STAR 635 （分辨率可达 25 nm）	abberior STAR ORANGE Alexa Fluor 594		abberior STAR GREEN Oregon Green 488
根据样品推荐		ATTO 647N ATTO 643 ATTO 633 Alexa Fluor 647 Cy5	abberior STAR 580 abberior STAR 600 ATTO 594 ATTO 590 Cy3		abberior STAR 488 Alexa Flour 488 ATTO 488 FITC

脉冲 STED 激光器	波长 [nm]	775			595
激发激光器	波长 [nm]	640	561	594	485
abberior 显微镜		INFINITY FACILTY STEDYCON	INFINITY FACILTY STEDYCON		INFINITY FACILTY
始终推荐		abberior LIVE 610 SIR	abberior LIVE 550 abberior LIVE 560 abberior LIVE 590		abberior LIVE 510 Oregon Green 488
根据样品推荐		DID	ATTO 590		PicoGreen

abberior 提供两种不同程序的培养哺乳动物细胞（贴壁）免疫标记方案：免疫标记细胞骨架物质（甲醇固定）和免疫标记膜结合细胞器（甲醛固定）。

您可在这里下载 abberior 免疫标记推荐方案：

abberior 提供使用 abberior LIVE 探针进行哺乳动物贴别活细胞溶酶体（抑肽素）、肌动蛋白（肌动蛋白聚合诱导剂）或微管蛋白（卡巴他赛）的标记方案。

您可在这里下载 abberior 活细胞标记方案：

abberior 提供两种不同程序的抗体标记方案：

标记度 (DOL) 是与一个蛋白分子（如：抗体）偶联的染料分子的平均数量。DOL 可根据标记抗体的吸收光谱测定。

程序

对于 DOL 测定，应对抗体共轭溶液进行凝胶过滤。然后通过窗口（从约 250 nm 开始覆盖偶合染料整个吸收波段）获取溶液的紫外/可见光谱（参见 abberior 提供的染料数据表）。应使用紫外透明石英比色杯获取吸收光谱。读取吸收光谱的以下数据：

λ_max:		吸光率最大处波长（应接近纯染料最小吸光率，比照相应数据表）
A_max:		λ_max 时的吸光率
A₂₈₀:		280 nm 时的吸光率

分析

使用测量值，按照下式计算 DOL：

式中符号含义：

A_prot:		280 nm 时纯蛋白吸收率（蛋白最大吸收率）
ε_prot:		280 nm 时纯蛋白摩尔消光系数 (单位 M^-1cm^-1)
ε_max:		吸光率最大处染料摩尔消光系数 (单位 M^-1cm^-1) 。对于 abberior 染料，εmax 规定于相应的产品数据表中。
C₂₈₀:		校正系数，取决于染料特性。对于 abberior 染料，C₂₈₀ 规定于染料数据表中。
ε_prot:		280 nm 时纯蛋白摩尔消光系数 (单位 M^-1cm^-1) 。除非抗体供应商另有规定，必须通过单独测量确定。

请注意，上述公式只有在最大吸光率时的染料消光系数 εmax 等于最大吸光率时的染料 – 抗体共轭物数据才会准确。在实际中，计算 DOL 可能存在约 20 % 偏差。