自适应光学
即使是对组织等浑浊样品,也能够获得理想的成像条件,正是所有显微镜技术人员的梦想。但在现实中,样本通常具有不均一性,而且封片与浸没介质的折射率很少能够完美匹配。折射率不匹配将影响显微镜的聚焦性能,导致图像分辨率低和质量差。abberior 使用自适应光学解决了这个问题。我们的自适应光学系统基于可变形镜,对于大多数样本,都可使显微镜保持成像质量。校正可动态进行,使您无后顾之忧。
自动像差校正
说明
在大约 6 微米深度记录的 NUP98-abberior STAR RED 和 GM130-abberior STAR ORANGE 。
样品由 abberior GmbH 制备。
自适应光学
使光束与样品匹配。
如何让从盖玻片到样品内部,数百微米深层组织图像持续保持清晰?
我们基于可变形镜的自适应光学系统可以精确做到:通过校正浸没介质和封片介质之间的折射率不匹配和样品引起的像差,使图像各部分保持清晰明亮。即使对于很大的聚焦深度、任何物镜和任何封片介质也是如此。
L3 期果蝇幼虫前半部倒置图。肌动蛋白染色(鬼笔环肽 ATTO 647N)。当记录图像录时,可变形镜自动跟随聚焦深度进行像差补偿。一旦设置完成,即使有一定深度都可自动拍摄明亮的高分辨率图像。
样品由海德堡 EMBL 的 Sebastian Schnorrenberg 提供。
从共聚焦显微镜到多光子成像,再到2D- 和 3D-STED,当聚焦到折射率与浸没介质不同的样品或聚焦到内部不均一的样品时,所有技术都会不可避免地出现像差。使用可变形镜预先补偿像差,来对光束进行整形,使得所有光线都回归到正确位置,以获得清晰聚焦。
样品与浸没介质之间折射率不匹配产生的球差和样品引起的高阶像差得到校正。如果不使用自适应光学,激光激发功率通常会随着聚焦深度的增加而增加,以补偿像差导致的信号损失。自适应光学可保持较厚样本深层的分辨率和亮度,确保在弱光条件下成像。
通过自适应光学,我们使用可变形镜控制 STED、激发和探测光束的波前,从而提高显微镜的性能。
从物镜进入样品的未畸变波前通常为球形,但样品折射率的变化会使其失真,导致聚焦不完美。尽管样品的局部变化也会导致像差,但在一定程度上,样品封片与浸没介质之间的折射率不匹配是其主要原因。
使用可变形镜可有效消除像差。可变形镜是其反射面的形状可以控制改变的自适应元件。通过应用校正的镜面形状(与样品产生的畸变相反),使光线聚焦恢复到匹配的形状,即使在组织深层也能提高信号和分辨率。
在不同深度成像的荧光微球层(63x WI 物镜,TDE 封片)。当聚焦深度改变时,变形镜自动跟随。在物镜的工作距离内,可基本保持亮度和分辨率。
- 厚切片中的信号最高可提高五倍
- 使 STED 实现卓越的分辨率
- 由其通常可实现 3D-STED 成像
- 自动跟踪球差
- 校正高阶像差(散光、彗形像差、三叶形像差等等)