脉冲 STED 激光器
abberior 由 STED 的发明者和研发者创立和管理,在 abberior,我们只接受性能优异的显微镜。对于 STED,我们依赖脉冲 STED 激光器,因为在几乎所有实际应用中,其性能都优于连续波激光器,包括门控或寿命增强 STED。在任何情况下,脉冲 STED 都能以最小激光功率提供尽可能高的分辨率。简单来说,脉冲 STED 激光器是 STED 成像更优的配备方式。
以最低激光功率获取尽可能高的分辨率
说明
abberior STAR RED 鬼笔环肽对鼠内耳毛细胞肌动蛋白染色。
样品由德国哥挺根大学医学中心 InnerEarLab 的 Christian Vogl 博士制备。
专业设备:
说明
清理后的成鼠肾脏样品 2 色 2D STED 图像。图示为显示足蛋白裂隙(绿,AlexaFluor594)之间肾病蛋白(红,abberior STAR 635P)结构的肾小体图像。
样品由瑞典斯德哥尔摩 KTH 的 D.UnnersjóJess 和 H.G.Blom 制备。
为什么我们只使用
脉冲 STED 激光器
脉冲 STED 中所有的 STED 光子在它们应该产生效应的时间里,即紧随激发脉冲之后,被送达到样品。这是 STED 光子发挥其物理意义的唯一时间,因为只有在受激分子自发产生低分辨率荧光之前,STED 光子才能发挥其作用。
当使用连续波 (cw) STED 光束时,非必要的 STED 光子扩布是不依照染料荧光寿命的,大多数光子到达的太早或太晚。事实上,大多数连续波 STED 光子都是在几乎所有受激分子已发射完毕时到达 – 这些光子在此时没有任何好处,只有害处!
虽然有很多方法(主要基于寿命感测)来补偿 cw-STED 的这种物理缺陷,但其效果甚微或主要依靠大量的数学后处理。因而为了不降低 STED 物理性能,以最低光剂量获得可能的最佳分辨率,必须要使用脉冲 STED 激光器。通过这种物理上更优越的方式记录的数据也更利于之后的数学反卷积算法。
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脉冲 STED @ 775 nm
最佳 STED 分辨率
纳秒脉冲 775 nm STED 激光。适用于荧光蛋白,如 mCherry;以及有机染料,如 Abberior STAR RED 或 STAR ORANGE 等超高分辨率成像。分辨率可达 20 nm;典型分辨率 < 30 nm
脉冲 STED @ 595 nm
适配活细胞成像
脉冲 595 nm STED 激光。适用于荧光蛋白,如 GFP、YFP;以及有机染料,如:Abberior STAR 440SX 或 STAR 488 等超高分辨率成像。分辨率可达 25 nm;典型分辨率 < 40 nm
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- 脉冲 STED 激光器可提供最佳分辨率
- 脉冲 STED 激光器可显著减少光照剂量
- 使用脉冲激光器可使 STED 光只应用在所需时间内:即在染料的荧光寿命期! 因为在这之后它只会有害。