TIMEBOW
abberior 就是为了打破光学成像的极限。我们成功发布了新技术 TIMEBOW。TIMEBOW 是一种用于测量荧光分子寿命的可靠方法。无论共聚焦还是超分辨图像都尽在掌握。结合我们高灵敏度的 APD 和革命性的 MATRIX 检测器, 您可以从多维度掌控信号，一切就是这么简单！ TIMEBOW让你研究呈现丰富的色彩。
给时间赋予色彩
说明
Autofluorescence in a plant stem cross section of Convallaria recorded with FACILITY. Image quality is improved by removing the background through MATRIX detection. This is combined with TIMEBOW lifetime imaging to show the differences in fluorescence lifetime due to the type of autofluorescent molecule and their nano-environment.
说明
Autofluorescence in a plant stem cross section of Convallaria recorded with FACILITY. A large area, 10 by 10 tiles, each 125 µm by 125 µm, was imaged and stitched with image tiling in Fiji for ImageJ. This is combined with TIMEBOW lifetime imaging to show the differences in fluorescence lifetime due to the type of autofluorescent molecule and their nano-environment.
说明
Confocal vs MATRIX + TIMEBOW STED
Actin in microvilli of CaCo2 cells recorded with FACILITY. Fixed cells were stained with abberior STAR RED phalloidin. Imaging of the intense-background sample is optimized by MATRIX detection by directly subtracting unfocussed data. To boost resolution TIMEBOW is used, keeping STED laser power low. Lifetime information enables the selective exclusion of STED-affected emission at the rim of each measurement.
We thank Prof. Dorothee Günzel and Jörg Piontek (Charité, Berlin, DE) for providing this sample.
说明
TIMEBOW STED vs MATRIX + TIMEBOW STED
Actin in microvilli of CaCo2 cells recorded with FACILITY. Fixed cells were stained with abberior STAR RED phalloidin. Imaging of the intense-background sample is optimized by MATRIX detection by directly subtracting unfocussed data. To boost resolution TIMEBOW is used, keeping STED laser power low. Lifetime information enables the selective exclusion of STED-affected emission at the rim of each measurement.
We thank Prof. Dorothee Günzel and Jörg Piontek (Charité, Berlin, DE) for providing this sample.
说明
Four-color staining of fixed mammalian cells recorded with FACILITY showing nuclear pores (NUP968, STAR RED), Golgi membrane (GM130, STAR 635), Golgi medial rims (Giantin, STAR ORANGE) and actin (STAR 580 phalloidin). Shown left, just using spectral information, STAR RED and STAR 635 (magenta) cannot be separated, because of their similar excitation properties. The same goes for STAR ORANGE and STAR 580 (grey).
With the lifetime information collected by TIMEBOW, these dyes can be distinguished, turning an image with two recording channels into a four-color image. To achieve super-resolution only one STED laser at 775 nm was used.
All utilized dyes are manufactured by abberior.
说明
Live-cell sample of an Arabidopsis root tip suspended in water recorded with FACILITY. A subset of cells expresses a YFP construct. Lifetime imaging with TIMEBOW shows shifts in YFP fluorescence lifetime caused by the proteins nano-environment.
We thank Dr. Fábián Attila and Soós Vilmos (ATK, Brunszvik, HU) for providing this sample. Contact: soos.vilmos@atk.hu.
说明
FLIM image of mammalian cells labeled with antibodies against Tom20/Atto 647N and Nup153/abberior STAR 635P. Note that nuclear pore (Nup) complex subunits appear to be localized in the cytoplasm, which is due to the Nup import pathway into the nuclear membrane.
说明
用FACILITY记录的铃兰植物茎横切面的自发荧光。通过Fiji的拼接功能，我们把tile scan得到的一百张图像（每张图像大小为125 µm x 125 µm）拼成一张10 x 10的大视野图。通过TIMEBOW 荧光分子寿命成像，可以呈现不同自发荧光分子及其微环境在荧光寿命上的差异。
专业设备:
说明
Confocal vs MATRIX + TIMEBOW STED
用FACILITY记录CaCo2细胞微绒毛中的肌动蛋白。用abberior STAR REDphalloidin染固定后的细胞。通过直接移除焦平面外的背景，MATRIX可以优化高背景样本的成像。TIMEBOW的使用可以在保持较低STED 激光功率的同时进一步提高分辨率。在每次测量中，荧光分子的寿命信息可以选择性地排除受 STED 影响的荧光。
感谢 Dorothee Günzel 教授和 Jörg Piontek（Charité, 柏林, 德国）提供了这个样本。
专业设备:
说明
TIMEBOW STED vs MATRIX + TIMEBOW STED
用FACILITY记录CaCo2细胞微绒毛中的肌动蛋白。用abberior STAR REDphalloidin染固定后的细胞。通过直接移除焦平面外的背景，MATRIX可以优化高背景样本的成像。TIMEBOW的使用可以在保持较低STED 激光功率的同时进一步提高分辨率。在每次测量中，荧光分子的寿命信息可以选择性地排除受 STED 影响的荧光。
感谢 Dorothee Günzel 教授和 Jörg Piontek（Charité, 柏林, 德国）提供了这个样本。
专业设备:
说明
用 FACILITY 拍摄的固定后的哺乳动物细胞，四种染色分别是nuclear pores (NUP968, STAR RED)、Golgi membrane (GM130, STAR 635)、Golgi medial rims (Giantin, STAR ORANGE) 和 actin (STAR 580 phalloidin)。如左图所示，仅使用光谱信息，我们无法区分 STAR RED 和 STAR 635 （品红色），因为它们具有相似的激发属性。对 STAR ORANGE 和 STAR 580 （灰）也是一样的。
通过 TIMEBOW可以收集荧光分子的寿命信息，从而区分这些染料，将双通道图像变成四色图像。为了实现超分辨率，我们只使用了一个 775 nm 的 STED 激光。
所使用的染料均由 abberior 生产。
专业设备:
说明
这是用FACILITY记录的悬浮在水中拟南芥（Arabidopsis）根尖的活细胞。细胞表达了构建了YFP的质粒。使用TIMEBOW进行的荧光分子寿命成像，显示了由微环境引起的 YFP 荧光寿命的变化。
We thank Dr. Fábián Attila and Soós Vilmos (ATK, Brunszvik, HU) for providing this sample. 联系方式: soos.vilmos@atk.hu
专业设备:
说明
Tom20/Atto 647N 和 Nup153/abberior STAR 635P 抗体标记哺乳动物细胞 FLIM 图像。请注意，由于 Nup 具有到核膜的输入途径，因此核孔 (Nup) 复合次单元可在细胞质中定位。
TIMEBOW
有效的评估荧光分子寿命数据
荧光分子的寿命成像一直是重要的研究方法，这也不是什么新鲜事。这就是为什么所有 abberior 显微镜都可以很容易配备荧光分子寿命成像的原因。
我们作为STED 和 MINFLUX的发明者，您对我们有更多期望完全是顺理成章的。更多选项，更快速度，更加易用，更多可能。这就是TIMEBOW。这个强大的工具会把荧光分子寿命数据转化为丰富多彩的图像。而且直接集成到我们的 LIGHTBOX 软件中，您能够无缝地处理数据。
带有 TIMEBOW 的LIGHTBOX 软件简单直观
图片1
自发荧光样品中由不同颜色编码的荧光寿命：铃兰（Convallaria）的植物茎横截面。
带有 TIMEBOW 的LIGHTBOX 软件简单直观
图片 2
没有荧光分子寿命数据的灰度图。通过使用 MATRIX 探测器去除背景，使图像质量已经得到改善。
带有 TIMEBOW 的LIGHTBOX 软件简单直观
图片 3
一键打开相量图（phasor plot）并访问其荧光分子的寿命数据。
带有 TIMEBOW 的LIGHTBOX 软件简单直观
图片4
只需再单击一次，即可获得不同色彩编码的荧光分子寿命图像。
TIMEBOW
工作中充满趣味
为了更形象地向您展示荧光分子寿命数据，TIMEBOW 使用相量分析。这将动态的荧光衰减时间转变为一个方便分析的分布图，直接地看到不同寿命荧光分子群体的分布。该分布图是交互式的，可让您在几秒钟内处理荧光分子的寿命信息。
TIMEBOW 让我们可以轻松地分辨不同结构
图片1
在铃兰（Convallaria）的植物茎横断面上，荧光分子寿命被分为四类。
TIMEBOW 让我们可以轻松地分辨不同结构
图片 2
可以通过使用MATRIX去除背景来提高图像质量。TIMEBOW 为您提供交互式的相量图。
TIMEBOW 让我们可以轻松地分辨不同结构
图片 3
通过在相量图中简单地绘制圆形划分区域，可以确定不同组分。从最长的荧光分子寿命开始……
TIMEBOW 让我们可以轻松地分辨不同结构
图片 4
…然后通过添加更多圆形区域来确定更多的组分 …
TIMEBOW 让我们可以轻松地分辨不同结构
图片 5
……有更多的圆形分区……就能划分出更多组分……
TIMEBOW 让我们可以轻松地分辨不同结构
图片 6
……直到一切被很好地区分开。
TIMEBOW 让我们可以轻松地分辨不同结构
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最后，将这四个组分组合在一起，在样本中显示出明显不同的分布。
TIMEBOW
你一定会喜欢的
我们的超分辨率成像技术已经在所有空间维度上产生了令人惊叹的图像。现在我们对时间维度做同样的事情。灰度图像变成多彩图像，因为不同色彩编码的荧光分子寿命数据揭示了看不见的结构。同一光谱通道中的荧光团可以被瞬间分开，为您提供比以往更多的通道和更大的灵活性。
用一个 STED 激光能实现 4 色成像吗？有TIMEBOW当然可以！
图片 1
仅使用一个 STED 激光拍摄的超分辨率四色图像。
用一个 STED 激光能实现 4 色成像吗？有TIMEBOW当然可以！
图片 2
一般来讲，荧光标记要求之一是：具有相似激发光谱的染料不能组合在一个样品中。但在这里，这正是我们所做的！
用一个 STED 激光能实现 4 色成像吗？有TIMEBOW当然可以！
图片 3
只需在相量图中画一条线，TIMEBOW 即可直接分开不同的荧光寿命。现在多个组分根据其不同的荧光寿命得以被区分。
用一个 STED 激光能实现 4 色成像吗？有TIMEBOW当然可以！
图片 4
将所有分开的图层组合在一起，创建出一个四色图像，即便共聚焦图像也已经看起来令人震惊……
用一个 STED 激光能实现 4 色成像吗？有TIMEBOW当然可以！
图片 5
……居然还带有超分辨率。
TIMEBOW + MATRIX
来自abberior的搭配
当然， TIMEBOW 可以与我们的 MATRIX 阵列探测器一起使用。这种组合使用获得一加一大于二的效果。它为您带来：更高的信噪比、更好的分辨率和更宽的动态范围。MATRIX 的二十多个传感器元件中的每一个都同时用于记录荧光分子的寿命信息和源于焦平面的光子信息。有了这些数据，我们可以比普通共聚焦针孔更好地去除背景，并渲染出令人惊叹的图像，不仅信息更丰富，而且对比度也更加出色。
TIMEBOW不仅用于荧光分子的寿命测量，还可用于提高 STED 分辨率。这是因为远离甜甜圈中心的荧光基团会接收到更高功率的 STED ，因此其寿命会更短。换句话说，荧光分子的寿命编码了额外的空间信息。使用它可以有效地提高图像的分辨率。
利用TIMEBOW锐化图像
图片1
使用 MATRIX 去除微绒毛中肌动蛋白的背景 STED 成像具有特殊的属性，TIMEBOW 充分发挥这个特性，来进一步提高分辨率……
利用TIMEBOW锐化图像
图片 2
…借助荧光分子的寿命成像，移除不在 STED 甜甜圈中心的短寿命组分。这是在相量图（phasor plot）中，通过简单地拖动分隔线来实现。
样品由Dorothee Günzel教授 和Jörg Piontek (Charité)提供。
荧光分子的寿命成像
对于荧光信号中每个单独的光子，我们不仅可以测量到它从哪里来的，还可以测量出它是何时来的。由于后者取决于它是什么类型的分子以及它所处的微环境，因此会有大量有价值的信息等待着我们。例如，我们可以使用动态的时间信息来区分不同的荧光团、用相同荧光团标记的不同结构，甚至可以使用它来提高分辨率。
那么有什么问题呢？其实，在量子世界中，所有这些信息都是隐藏起来的，并不容易获取。光子根本不像我们希望的那样可预测，因此我们必须使用概率学和统计学来提取我们想要的信息。庆幸的是, TIMEBOW 会处理所有信息，它用起来简单和直观，可以无缝地融入您实验室的日常工作。而且它还可以和 MATRIX 协同工作，这是一个很不错的组合。
阵列探测
从不同的角度看待事物会拓宽你的视野。例如，我们都知道人类的立体视觉源于我们拥有两只眼睛而不是一只眼睛，这可以说最简单的阵列形式。
借助 MATRIX, 我们可以同时利用 20 多个单独的探测器，从物理上区分出哪些光子来自焦平面外，哪些来自焦平面。就像你的眼睛知道什么是近的，什么是远的。
这使得我们能够比机械针孔更好地去除背景，并且显著改善样品中，特别是在厚样品中的对比度。与 TIMEBOW 一起使用，是一个很不错的搭配组合。
- 将动态的时间信息转换为由色彩编码的荧光分子寿命图像
- 仅使用一个 STED 激光即可实现带有超分辨的四色图像
- 提高共聚焦和 STED 的分辨率
- 使用 MATRIX：更高的信背景比、更好的分辨率和更出色的动态范围—— abberior 独家提供