染料和标记物的常见问题
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常见问题
我们的染料偶联抗体在室温下运输。运输后,应在 4 °C 条件下短期贮存。要长期贮存,我们建议等分染料,然后在 -20 °C 至 -80 °C 条件下贮存。
应避免反复冻融循环!
对于任何样品,抗体的正确浓度应根据经验确定。
但是,我们推荐使用 1:50 到 1:200 的稀释度作为起始值。
很多 abberior 染料都是酰肼染料。如果您对这些染料或定制产品感兴趣,请联系我们,我们将尽最大努力向您提供合适的解决方案。
除我们网页上展示的常规产品外,我们可提供其他具有不同特异性的产品。由于需要专门生产,我们将收取定制附加费。
abberior 所有用于 STED 显微镜的染料都同样可用于共聚焦显微镜。事实上,优质 STED 染料也是优质的共聚焦显微镜染料。
我们在网站产品版块展示了多种应用实例。您可在这里找到经过验证的实验条件和正确染料组合的相关信息。另外,您还可了解如何利用我们染料的特殊性能。如果您有任何问题,请联系我们 (info@abberior.com)。
产品不含类似叠氮化物或乙汞硫水杨酸钠盐等防腐剂。
封片介质
abberior 提供不同封片介质。
abberior MOUNT 封片介质是折射率为 1.38 的含水封片介质, 应用非常方便。但是,由于水的蒸发和封片介质的聚合反应(abberior MOUNT SOLID),折射率将随时间而变化。
TDE Mounting 介质是 2,2′-巯基二乙醇基封片介质,折射率为 1.408 – 1.518, 对于很多应用,TDE Mounting 介质优于含水封片介质, 尤其是高要求应用如:4Pi 显微镜、3D STED 显微镜或 isoSTED 显微镜,因为其折射率将始终保持不变。
在 STORM、dSTORM 和 GSDIM 显微镜中,通常使用在测量之前制备的封片介质。
其中的一个原因是这些封片介质所含的成分随着时间而发生降解(如:酶、MEA 等)。为此,我们无法供应这些封片介质。
对于我们的 CAGE 染料,可使用传统封片介质如:PBS, MOWIOL、abberior MOUNT 等。
使用 abberior MOUNT 封片介质封固的盖玻片可使用双组份硅胶 Twinsil® (Picodent, Wipperfürth, Germany) 或透明指甲油(如:wet n wild Shine Nail Color Clear Nail Protector)来密封。
使用 TDE 介质封固的盖玻片应使用透明指甲油(如:wet n wild Shine Nail Color Clear Nail Protector)来密封。双组份硅胶 Twinsil® (Picodent, Wipperfürth, Germany) 通常不完全聚合。
请不要使用彩色指甲油或含金属颗粒的指甲油。
对于我们的 CAGE染料,可使用常规封片介质如:PBS、MOWIOL、abberior MOUNT 等。
NHS 酯
在含水溶剂中,NHS 酯非常不稳定。
因此,我们建议使用无水二甲基甲酰胺溶解 NHS 酯。另外也可使用无水高纯二甲亚砜。
不同染料中的 NHS 酯稳定性不同。
对于在 4 °C 干燥条件下保存的非溶解染料,保存期一般为 6 – 12 个月。如果在 -20 °C 条件下保存,保存期将显著延长, 在 -80 °C 条件下保存期则更佳。
对于溶解 NHS 酯,保存期主要取决于溶解或稀释染料所使用的溶剂。最好使用无水溶剂。
羧酸 (RCOOH) N – 羟基琥珀酰亚胺 (NHS) 酯看起来像 RCOONS (其中 NS 为 N-琥珀酰亚胺残基)。它们容易与伯胺 (R’NH2) 发生反应生成水解稳定的酰胺 RCONHR’ 和 N-羟基琥珀酰亚胺。
醇类 (RCH2OH) N-羟基琥珀酰亚胺碳酸盐看起来像 RCH2OCONS,其中 NS 为 N-琥珀酰亚胺残基(同上)。它们容易与胺 R’NH2 发生反应生成水解稳定的氨基甲酸乙酯 RCH2OCONHR’ 和 N-羟基琥珀酰亚胺。
N-羟基琥珀酰亚胺碳酸盐与胺的反应速度相对略慢,但其稳定性通常高于 N-羟基琥珀酰亚胺酯。
鬼笔环肽
鬼笔环肽以冻干状态(固态)运输。抵达后必须溶解在甲醇(纯)中。根据染料的不同,荧光团偶联鬼笔环肽的溶解度约为 0.1 – 0.5 mg/ ml (甲醇)。
对于哺乳动物细胞染色,鬼笔环肽(含甲醇)的储存液需要用水性缓冲液稀释到终浓度 1 Unit/ ml (取决于应用、细胞系等)